逆转录病毒载体
MMLV逆转录病毒基因表达载体系统是一种非常高效的,能把外源基因稳定整合到哺乳动物细胞基因组的系统,也是在iPS细胞制备中特别受欢迎的基因转导方法。
MMLV逆转录病毒载体来源于莫洛尼(氏)鼠白血病病毒,属于逆转录病毒家族,野生型逆转录病毒基因组是线性双正链RNA。
MMLV逆转录病毒重组载体构建完成后与辅助质粒一起转染进入包装细胞。在包装细胞中,位于两个长末端重复序列(LTRs)之间的DNA片段会被转录成RNA,由辅助质粒表达的病毒蛋白将其包装形成病毒颗粒。包装后的活体病毒将会被释放到上清液中,可以直接收集或进一步浓缩病毒转染靶细胞。
当病毒转导靶细胞时,释放到宿主细胞中的病毒RNA借助逆转录酶逆转录成DNA,然后随机整合进宿主细胞的基因组中。在病毒载体中,位于两个LTR的DNA片段和病毒基因组都会稳定整合到靶细胞的基因组中。
关于逆转录病毒基因表达载体的更多信息,请参考以下文献。
参考文献 | 主题 |
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Exp Hematol. 31:1007 (2003) | Review |
J Virol. 61:1639 (1987) | Extended packaging signal increases the titer of MMLV vectors |
Gene Ther. 7:1063 (2000) | Tropism of MMLV vectors depends on packaging cell lines |
Nat Protoc. 6:346 (2011) | Tropism of MMLV vectors depends on packaging plasmids |
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